德晟推薦使用更合適的生物緩沖劑
為實驗選擇合適的生物緩沖液可能是一項非常艱巨的任務可用的選項很多（HepesMopsTrisbicine等）很容易造成混淆下面是一份清單以便選擇緩沖鹽進行研究時應考慮的一些重要點
緩沖范圍
每個緩沖液的pH范圍內緩沖能力越高該容量通常由緩沖區(qū)的pKa決定您必須選擇pKa值在所需范圍中間附近的緩沖液（通常建議使用pKa值至少在目標pH值一個pH單位內的緩沖液）
實驗過程中的pH值變化
要考慮實驗過程中pH值可能會升高或降低如果希望pH值增加則必須選擇pKa稍高于實驗開始時的最佳值的緩沖液如果期望pH值降低則選擇pKa較低的緩沖液
緩沖液濃度
調整緩沖液的濃度以具有足夠的實驗系統(tǒng)容量如果緩沖液的濃度太低它將無法穩(wěn)定溶液的pH值相反如果濃度太高則緩沖液很可能會影響實驗通常建議使用高于25 mM的濃度
對于不主動交換氫質子的系統(tǒng)通常建議濃度為25-100mM對于可能發(fā)生質子交換的建議使用比被交換質子的摩爾濃度高20倍的緩沖劑濃度在制備緩沖溶液時切記將溶液濃度調至預定使用濃度
溫度變化
根據實驗的溫度設置緩沖溶液pH溫度直接影響緩沖液的pKa因此影響pH值和緩沖能力這種情況在生物緩沖中非常關鍵需要準確的氫離子濃度才能使反應以最高效率運行
某些緩沖液（例如PIPES）的pKa對溫度變化不太敏感但是其他如TRISACESTAPSTES或Tricine等受這些變化的影響更大
下圖顯示了生物緩沖液溫度的近似pKa變化
緩沖 | 有用的pH范圍 | pKa | pKa | pKa | pKa | pKa |
MES | 5.5-6.7 | 6.38 | 6.15 | 6.10 | 5.9-6.3 | 5.98 |
BIS-TRIS | 5.8-7.2 | 不適用 | 6.54 | 6.46 | 6.3-6.7 | 6.25 |
ACES | 6.1-7.5 | 7.32 | 6.88 | 6.78 | 6.6-7.0 | 6.56 |
PIPES | 6.1-7.5 | 7.02 | 6.80 | 6.76 | 6.6-7.0 | 6.66 |
MOPSO | 6.2-7.6 | 不適用 | 6.95 | 6.87 | 6.7-7.1 | 不適用 |
BES | 6.4-7.8 | 7.50 | 7.10 | 7.09 | 6.9-7.3 | 6.90 |
MOPS | 6.5-7.9 | 不適用 | 7.20 | 7.14 | 7.0-7.4 | 6.98 |
HEPES | 6.8-8.2 | 7.85 | 7.55 | 7.48 | 7.45-7.65 | 7.31 |
TES | 6.8-8.2 | 7.92 | 7.50 | 7.40 | 7.2-7.6 | 7.14 |
PIPPS | 6.8-9.2 | 不適用 | 不適用 | 不適用 | pKa1（3.7-4.1） | 不適用 |
TRIS | 7.2-9.0 | 8.90 | 8.30 | 8.06 | 7.8-8.2 | 7.70 |
HEPPS | 7.3-8.7 | 不適用 | 8.10 | 8.00 | 7.8-8.2 | 7.81 |
TRICINE | 7.4-8.8 | 8.60 | 8.15 | 8.05 | 8.0-8.3 | 7.80 |
GLYCYLGLYCINE | 7.5-8.9 | 9.00 | 8.40 | 8.25 | 7.9-8.3 | 7.90 |
Bicine | 7.6-9.0 | 8.70 | 8.35 | 8.26 | 8.1-8.5 | 8.04 |
TAPS | 7.7-9.1 | 不適用 | 8.49 | 8.40 | 8.25-8.65 | 8.18 |
CHES | 8.6-10.0 | 不適用 | 9.55 | 9.49 | 9.3-9.7 | 9.36 |
CAPSO | 8.9-10.3 | 不適用 | 不適用 | 9.60 | 9.4-9.8 | 9.43 |
CAPS | 9.7-11.1 | 不適用 | 10.56 | 10.40 | 10.2-10.6 | 10.02 |
