高效液相色譜儀的使用和原理分析
高效液相色譜儀的使用
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液不受樣品揮發性的限制流動相可選擇的范圍寬固定相的種類繁多因而可以分離熱不穩定和非揮發性的離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質
與試樣預處理技術相配合HPLC 所達到的高分辨率和高靈敏度使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能能夠分離復雜相體中的微量成分隨著固定相的發展有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離
HPLC成為解決生化分析問題最有前途的方法由于HPLC具有高分辨率高靈敏度速度快色譜柱可反復利用流出組分易收集等優點因而被廣泛應用到生物化學食品分析醫藥研究環境分析無機分析等各種領域高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向
液相色譜- 質譜聯用技術受到普遍重視如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等 液相色譜- 紅外光譜聯用也發展很快如在環境污染分析測定水中的烴類海水中的不揮發烴類使環境污染分析得到新的發展
實驗室圖片
高效液相色譜儀的原理
分配系數與組分流動相和固定相的熱力學性質有關也與溫度壓力有關在不同的色譜分離機制中K有不同的概念吸附色譜法為吸附系數離子交換色譜法為選擇性系數 (或稱交換系數)凝膠色譜法為滲透參數但一般情況可用分配系數來表示
在條件(流動相固定相溫度和壓力等)一定 樣品濃度很低時(CsCm很?。rK只取決于組分的性質而與濃度無關這只是理想狀態下的色譜條件在這種條件下得到的色譜峰為正常峰在許多情況下隨著濃度的增大K減小這時色譜峰為拖尾峰而有時隨著溶質濃度增大K也增大這時色譜峰為前延峰因此只有盡可能減少進樣量使組分在柱內濃度降低K恒定時才能獲得正常峰