噠草特檢測方法
1．分析目標化合物
噠草特噠草特羥基物噠草特羥基物結合物
2儀器設備
帶紫外分光光度檢測器的高效液相色譜儀
3試劑
除下列試劑外使用附錄2所列試劑
0.2 mol／L乙酸銨緩沖液將15.4g乙酸銨溶解在水中至1000mL加氨水調節pH9
4．標準品
噠草特含噠草特99％以上熔點為27℃
噠草特羥基物含噠草特羥基物99％以上熔點為216℃~218℃
5．試驗溶液的制備
a 提取方法
谷類豆類和種子類將樣品粉碎通過420μm的標準網篩后稱取其10.0g加入20mL水放置2小時
蔬菜準確稱取約1kg樣品必要時定量加入適量水攪碎混合均勻后稱取相當于20.0g樣品的量
加入120mL丙酮0.2 mol／L乙酸銨緩沖液 嗎啉（100200.5）混合溶液攪拌3分鐘后用涂布1cm厚硅藻土的濾紙抽濾于磨口減壓濃縮器中取出濾紙上的殘留物加入50mL上述混合溶液按上述同樣操作合并濾液于減壓濃縮器中40℃以下濃縮至約70mL
將其移入預先注入50mL乙酸乙酯的200mL分液漏斗（Ⅰ）中用15mL0.2 mol／L乙酸銨緩沖液洗滌上述減壓濃縮器的茄型瓶合并濾液于上述分液漏斗中用振蕩器激烈振蕩5分鐘后靜置水層移入200mL分液漏斗（Ⅱ）中加入50mL乙酸乙酯按上述同樣操作水層移入200mL三角瓶中
b水解
加入1mol／L硫酸調節pH4裝上空氣冷凝管在60℃加熱40分鐘冷卻后移入200mL分液漏斗中用15mL蒸餾水洗滌三角瓶合并洗液于分液漏斗中加入50mL乙酸乙酯用振蕩器激烈振蕩5分鐘后靜置乙酸乙酯層移入200mL三角瓶中水層中加入50mL乙酸乙酯按上述同樣操作合并乙酸乙酯層于上述三角瓶中加入適量的無水硫酸鈉不時搖蕩混合放置15分鐘后濾入磨口減壓濃縮器中再用20mL乙酸乙酯洗滌三角瓶以此洗液洗滌濾紙上的殘留物重復操作兩次合并兩洗液于減壓濃縮器中40℃以下除去乙酸乙酯殘留物中加入1滴乙酸用20mL丙酮正己烷（19）混合溶液溶解
c凈化
① 合成硅酸鎂柱色譜法
在內徑15mm長300mm色譜柱中注入5g懸浮在正已烷中的柱色譜用合成硅酸鎂其上面再裝入約5g無水硫酸鈉放出正已烷至柱上端留有少量正已烷柱中注入a 提取方法所得的溶液后注入80mL丙酮正己烷（19）混合溶液棄去流出液再注入60mL丙酮正己烷（28）混合溶液收集流出液于磨口減壓濃縮器中40℃以下除去丙酮和正己烷殘留物中加入1滴乙酸用10mL丙酮正己烷（28）混合溶液溶解
②硅膠柱色譜法
在內徑15mm長300mm色譜柱中注入5g懸浮在正已烷中的柱色譜用硅膠（粒徑630～200μm）其上面再裝入約5g無水硫酸鈉放出正已烷至柱上端留有少量正已烷柱中注入①合成硅酸鎂柱色譜法所得的溶液后注入10mL丙酮正己烷（28）混合溶液棄去流出液再注入100mL丙酮正己烷（28）混合溶液收集流出液于磨口減壓濃縮器中40℃以下除去丙酮和正己烷殘留物中加入甲醇溶解準確至1mL此為試驗溶液
6操作方法
a 定性試驗
按下列操作條件進行試驗試驗結果應與標準品的一致
操作條件
柱填充劑十八烷基甲硅烷基化硅膠（粒徑5μm）
柱內徑4～6mm長150～250mm不銹鋼管
柱溫40℃
檢測器波長280nm
流動相甲醇水乙酸（460.05）混合溶液調整流速使在13～14分鐘流出
b 定量試驗
根據與a 定性試驗相同試驗條件所得的試驗結果用峰高法或峰面積法對噠草特羥基物進行定量其乘以系數1.83求得噠草特的含量
7．定量限
0.01 mg/kg （油菜籽0.05 mg/kg）
8．注意事項
將噠草特和噠草特羥基物結合物轉變成噠草特羥基物之后對噠草特羥基物進行定量其含量乘系數換算成噠草特的含量此為噠草特的分析值
