大腸菌群測試片是什么?這篇文章告訴你
大腸菌群是指在一定培養條件下能發酵乳糖產酸產氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽孢桿菌它是評價食品衛生質量的重要指標之一目前已被廣泛應用于食品衛生檢驗工作中
大腸菌群多存在于溫血動物糞便人類經常活動的場所以及有糞便污染的地方大腸菌群數的高低表明了食品及食品生產過程中受污染的程度目前大腸菌群的檢測的傳統方法主要包括GB4789.3-2008SN/T1896-2007SN/T0169-2010等
Petrifilm是美國3M公司發明的一種進行菌落計數的干膜有操作簡單檢測周期短等優點它一旦投入使用將大大縮短檢測周期簡化實驗操作并取得較大的經濟收益
原理
Petrifilm大腸菌群測試片采用可再生的水合物干膜由上下兩層薄膜組成上層聚丙烯薄膜含有粘合劑指示劑及冷水可溶性凝膠下層聚乙烯薄膜含有大腸菌群生長所需的VRB培養基大腸菌群在發育時產生琥珀酸脫氫酶將上層薄膜中的指示劑還原成紅色非溶解性三苯甲從而使細菌著色另測試片表面覆蓋的薄膜可留住發酵乳糖的大腸菌群產生的氣體故測試片上紅色菌落周圍有氣泡者為大腸菌群
樣品處理
取樣品25mL(g)放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質杯內制成1:10的樣品勻液用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內振搖后成為1:100的稀釋液
接種
一般食品選1~2個稀釋度進行檢測含菌量少的液體樣品(如飲用純水和礦泉水等)可直接吸取原液進行檢測將大腸菌群測試片置于平坦實驗臺面揭開上層膜用無菌吸管吸取1mL樣品勻液垂直滴加到測試片中央處然后再將上層膜緩慢蓋下避免產生氣泡使用壓板(平面底朝下)放置在上層模中央處輕輕的壓下使樣液均勻覆蓋于圓形的培養面積上切勿扭轉壓板拿起壓板靜置至少1min使培養基凝固
培養
測試片的透明面朝上置于恒溫培養箱內堆疊片數不超過20片培養溫度為36℃±1℃培養24±2h
結果判讀
培養后大腸菌群在測試片上顯紅色可目視用菌落計數器放大鏡或Petrifilm自動判讀儀計數并可參考判讀手冊計數菌落數