白花蛇舌草提取物抑菌作用研究
白花蛇舌草Oldenlandia diffusa Willd Roxb為茜草科植物白花蛇舌草的帶根全草其葉形似蛇舌開白花而得名廣泛分布于長江流域及以南各省市其性味苦甘寒入心肝脾三經功效清熱解毒活血化瘀消炎止痛主治咽喉腫痛濕熱黃疸小便不利瘡癤腫痛急慢性膽囊炎泌尿道感染毒蛇咬傷等病癥[12]本實驗研究了白花蛇舌草提取物的抑菌作用旨在為臨床應用提供理論依據
1實驗材料
1.1菌種與培養基實驗選用金黃色葡萄球菌大腸桿菌綠膿桿菌和白色念球菌白色念球菌采用沙氏瓊脂培養基其他3種均采用牛肉膏蛋白棟培養基
1.2實驗藥液的制備白花蛇舌草購于浙江省臨海市中藥房稱取經70℃烘干粉碎后的白花蛇舌草10 g分別用沸水70%乙醇和60%丙酮提取反復多次直至浸出液色淡接著將浸出液除乙醇和丙酮并濃縮到8 ml用NaOH調pH至7.0使沉淀完全溶解并定容至10 ml即1 ml提取液為1 g白花蛇舌草粉末的提取物提取液過0.22 μm濾膜除菌貯存于4℃備用
2實驗方法
2.1抗菌譜初篩采用瓊脂平板打孔法接種金黃色葡萄球菌大腸桿菌或綠膿桿菌的平皿置于37℃培養箱中培養接種白色念球菌的平皿置于25℃培養箱中培養
2.2抑菌實驗采用試管連續稀釋法取裝有2 ml普通肉湯培養基10管排列于試管架上編號接種金黃色葡萄球菌大腸桿菌綠膿桿菌或白色念球菌然后以無菌操作法在第1支試管中加入供試液2 ml搖勻吸取2 ml加第2管中搖勻同法稀釋至第8支試管棄去2 ml以上各管加入預先備妥的稀釋菌液105cfu/ml0.1 ml第9管中只加入0.1 ml菌液作陽性對照第10管加入2 ml供試液后混勻棄去2 ml余下2 ml不加菌液作陰性對照將加入金黃色葡萄球菌大腸桿菌綠膿桿菌的各管置于37℃培養24 h將白色念球菌的各管置于25℃培養48 h觀察結果確定最低抑菌濃度MIC經培養后無菌生長的各管取20 μl涂布于固體平板上培養24 h后觀察細菌的生長狀況確定殺菌濃度MBC
3結果
白花蛇舌草對4種供試菌均有明顯的抑殺作用其中對金黃色葡萄球菌的抑殺效果最好大腸桿菌次之綠膿桿菌和白色念球菌相對較差見表1
表1白花蛇舌草提取物抗菌實驗結果mg/ml(略)
4討論
黃酮類化合物是藥用植物的一大類有效成分具有多種生物活性基主要作用之一是抑菌或殺菌[3]白花蛇舌草中有豐富的黃酮甾醇類化合物其總黃酮提取以乙醇回流法效率最高[4]本試驗結果顯示不同提取方法的抑殺效果存在一定的差異其中對金黃色葡萄球菌綠膿桿菌和大腸桿菌的抑殺效果均以乙醇提取為最好丙酮提取其次水提取最差而對于白色念球菌的抑殺效果則以水提取為最好乙醇和丙酮的提取物差別不大說明黃酮類是白花蛇舌草抑殺菌的有效成分同時還可能存在其他抑殺細菌的因素
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參考文獻
[1]冉先德.中華藥源第1卷上冊[M].黑龍江哈爾濱出版社1983256256.
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[3]俞佩芳.三種常見藥用植物抗菌作用的探討[J].華東師范大學學報自然科學版199418993.
[4]毛杏飛羅佳波.白花蛇舌草中總黃酮提取分離工藝的研究[J].中藥材2002257499500.